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将待存菌分纯后,用准备好的保护剂牛奶洗下菌苔,把菌悬液滴入菌种管后,在管口抽取少许棉花塞入管内细颈处,放入冰箱-40℃速冻40min,放入准备好的混有盐的冰中,接上真空泵,真空抽干呈粉末状,火焰封口,贴上标签,保存于-40℃冰箱。此法保存时间长,可达15年,不易变性,但需要专用仪器,一般实验室难以配备,而且过程复杂,操作难度大,需要较长时间才能完成。所以此方法适合具有条件的实验室菌种的长期保存。
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